SARS-CoV-2 S1 IgG ELISA Kit

INTENDED USE

SARS-CoV-2 S1 IgG ELISA Kit is a highly sensitive and specific enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection and qualitative measurement of IgG class antibodies against the S1 spike protein of SARS-CoV-2 virus in human blood.

This product is intended for the diagnosis of coronavirus disease 2019 (COVID-19). This product is intended for use by professional persons only.

OVERVIEW

In December 2019, a new coronavirus was identified in Wuhan, China, now officially designated as severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), which caused the outbreak of a coronavirus-associated acute respiratory disease called coronavirus disease 19 (COVID -19).

Signs and symptoms of COVID-19 can appear 2 to 14 days after infection, including fever, cough, shortness of breath or difficulty breathing, muscle pain and fatigue. In severe cases, the infection can further lead to pneumonia, severe acute respiratory syndrome (SARS), kidney failure, and death.

 

gentaur.be
gentaur.be

The spike protein (S) is an envelope anchored protein that mediates the recognition and binding of SARS-CoV-2 to host cells.

S comprises two functional subunits responsible for binding to the host cell receptor (S1 subunit) and fusion of the viral and cellular membranes (S2 subunit). The distal S1 subunit contains the receptor-binding domains, and contributes to the stabilization of the prefusietoestand of the membrane anchored S2 subunit which contains fusion devices .

Assay principle

ImmunoDiagnostics SARS-CoV-2 S1 IgG ELISA kit is a two-step incubation immunoassay kit. Recombinant SARS-CoV-2 spike protein S1 pre-coated on the polystyrene microwell strips may specifically contain anti-S1 antibodies in human serum or

plasmamonsters herkennen. Na een incubatie van 1 uur worden anti-S1-antilichamen opgevangen door geïmmobiliseerd S1-eiwit terwijl de ongebonden componenten worden weggespoeld. Daarna wordt een detectieoplossing die HRP-geconjugeerd anti-humaan IgG bevat toegevoegd voor nog een incubatie van 1 uur, waarbij HRP-geconjugeerd anti-humaan IgG bindt aan de IgG-klasse antilichamen die eerder aan het S1-eiwit op de plaat waren gebonden.

Na het verwijderen van niet-specifieke bindingen, wordt een HRP-substraatoplossing toegevoegd die 3,3 ‘, 5,5’-tetramethylbenzidine (TMB) bevat, wat resulteert in de vorming van een blauwe kleur. De kleurreactie wordt gestopt

gentaur.be
gentaur.be

 

door 2M H 2 ZO 4, het transformeren van de blauwe kleur naar gele signalen, die wordt gekwantificeerd door een absorptie-microtiterplaatlezer bij 450 nm. De kleurintensiteit is evenredig met de hoeveelheid antilichamen tegen S1RBP die in de putjes zijn gevangen.

MEEGELEVERDE REAGENTIA EN MATERIALEN

 

 

 

 

EEN

 

 

SARS-CoV-2 S1 gecoat

ELISA plaat

12 strips van 8 wells (96 wells in totaal) in een witte striphouder en verzegeld in een foliezakje met droogmiddel.                      Elk goed                bevat recombinant S1 van SARS-CoV-2. De microwell-strips kunnen

afzonderlijk worden gebruikt. Plaats ongebruikte putten of strips samen met het droogmiddel in de meegeleverde plastic afsluitbare opbergtas en keer terug naar 2-8 ° C. Eenmaal geopend, stabiel gedurende 4 weken bij 2-8 ° C.

B 5x assaybuffer 1 x 20 ml
C 10x wasbuffer 1 x 40 ml

 

 

D

100x detectie-antilichaam

Oplossing

1 x 0,12 ml
E Substraat oplossing 1 x 12 ml
F Stop oplossing 1 x 12 ml
G Negatieve controle 1 x 0,2 ml
H Afsnijcontrole 1 injectieflacon
ik Positieve controle 1 injectieflacon

 

MATERIALEN VEREIST, MAAR NIET MEEGELEVERD

  • Pipetten en
  • 96-wells plaat of handmatige
  • Buffer- en reagensreservoirs.
gentaur.be
gentaur.be

 

 

  • Papieren handdoeken of absorberend
  • Een microplaatlezer die het absorptievermogen bij 450 nm ka
  • Gedestilleerd water of gedeïoniseerd water.
  • Een horizontale schudmachine met microtiterplaat die in staat is tot 600 tpm (optioneel).

OPSLAG EN BEREIDING VAN TESTSTALEN

  • Er wordt gesuggereerd dat testmonsters onmiddellijk na scheiding van serum of plasma worden geanalyseerd of bij voorkeur bevroren worden bewaard (-20 0 C of lager) in Meerdere cycli van invriezen en ontdooien moeten worden vermeden. Dubbele test wordt aanbevolen.
  • Serum- of plasmamonsters met EDTA, natriumcitraat of heparine kunnen worden getest. Sterk lipemische, icterische of hemolytische monsters worden niet aanbevolen. Monsters met zichtbare microbiële besmetting mogen niet worden gebruikt.
  • Indien nodig, vortex-testserum of plasmamonsters bij kamertemperatuur om homogeniteit te garanderen. Centrifugeer vervolgens monsters bij 000 tot 15.000 tpm gedurende 5 minuten voorafgaand aan de assay om deeltjes te verwijderen. Sla deze centrifugatiestap niet over als de monsters troebel zijn en deeltjes bevatten.

 

OPSLAG EN STABILITEIT

  • De kit is alleen stabiel tot de vervaldatum indien bewaard bij 2-8 ° C in verzegelde De vervaldatum is de laatste dag van de maand die staat vermeld op het foliezakje en de kitcontainer.
  • De kit moet bij ontvangst bij 2-8 ° C worden bewaard en alle reagentia moeten vóór gebruik op kamertemperatuur worden Verwijder alle ongebruikte stroken met antigeencoating van de microtiterplaat, doe ze terug in het foliezakje en sluit opnieuw af.
  • Eenmaal geopend kunnen de strips maximaal een maand bij 2-8 ° C worden bewaard. Bescherm de reagentia tijdens opslag tegen verontreiniging met micro-organismen of chemicaliën om maximale prestaties te garanderen.Bewaar de cut-off en positieve controle bij 4 ° C, tot 3 maanden.

VOORZORGSMAATREGELEN EN VEILIGHEID

·        De ELISA-tests zijn tijd- en temperatuurgevoelig. Om onjuiste resultaten te voorkomen, volgt u strikt de stappen van de testprocedure en wijzigt u deze niet.

 

  • Wissel geen reagentia uit verschillende partijen uit en gebruik geen reagentia uit andere in de handel verkrijgbare De componenten van de kit zijn nauwkeurig op elkaar afgestemd voor een optimale uitvoering van de tests.
  • Zorg ervoor dat alle reagentia binnen de geldigheidsduur vallen die op de kitdoos en van dezelfde partij is Gebruik nooit reagentia na de vervaldatum vermeld op etiketten of dozen.
  • VOORZICHTIG – KRITISCHE STAP: Laat de reagentia en monsters vóór gebruik op kamertemperatuur (20-25 ° C) komen. Reagens voorzichtig schudden voor gebruik. Direct na gebruik terugbrengen bij 2-8 °
  • Gebruik alleen voldoende volume van het monster zoals aangegeven in de Als u dit niet doet, kan dit een lage gevoeligheid van de test veroorzaken.
  •  Raak de buitenbodem van de putten niet aan; vingerafdrukken of krassen kunnen het lezen verstoren.
  • Zorg er bij het lezen van de resultaten voor dat de bodem van de plaat droog is en dat er geen luchtbellen in de putjes zijn.

 

  • Laat de microtiterplaatwells na de wasstap nooit Ga onmiddellijk door naar de volgende stap. Vermijd de vorming van luchtbellen bij het toevoegen van de reagentia.
  • Vermijd langdurige onderbrekingen van Zorg voor dezelfde arbeidsomstandigheden voor alle putten.
  • Kalibreer de pipet regelmatig om de nauwkeurigheid van de verstrekking van monsters / reagentia te Gebruik voor elk monster en reagentia verschillende pipetpunten voor verwijdering om kruisbesmetting te voorkomen.
  • Raak bij het toevoegen van monsters de bodem van de put niet aan met de
  • Bepaal bij het meten met een plaatlezer de absorptie bij 450  De enzymatische activiteit van het HRP-conjugaat kan worden beïnvloed door stof en reactieve chemicaliën en stoffen zoals natriumhypochloriet, zuren, logen, enz. Voer de test niet uit in aanwezigheid van deze stoffen.
gentaur.be
gentaur.be

Alle monsters van menselijke oorsprong moeten als potentieel besmettelijk worden beschouwd. Strikte naleving van GLP-regels (Good Laboratory Practice) kan de persoonlijke veiligheid garanderen.

  • Eet, drink, rook of breng nooit cosmetica aan in het assaylaboratorium. Pipetteer nooit oplossingen via de
  • Chemische stoffen mogen alleen worden gehanteerd en verwijderd in overeenstemming met de huidige GLP (Good Laboratory Practices) en de lokale of nationale
  • De pipetpunten, flacons, strips en monsterhouders moeten worden verzameld en geautoclaveerd gedurende minimaal 2 uur bij 121 ° C of gedurende 30 minuten worden behandeld met 10% natriumhypochloriet om te worden ontsmet voordat verdere verwijderingsstappen worden genomen.
  • Oplossingen die natriumhypochloriet bevatten, mogen NOOIT worden geautoclaveerd. Material Safety Data Sheet (MSDS) beschikbaar op-Sommige reagentia kunnen als grondstof toxiciteit, irritatie, brandwonden of carcinogene effecten veroorzaken.
  • Contact met dehuid en het slijmvlies moet worden vermeden, maar is niet beperkt tot de volgende reagentia: de stopoplossing, de substraatoplossing en de wasbuffer.
  • De Stop-oplossing 2M H 2 ZO 4 is een Gebruik het met gepaste zorg. Veeg gemorste vloeistoffen onmiddellijk op en was ze met water als ze in contact komen met de huid of ogen.
  • ProClinTM 300 0.1% used as a preservative, may cause skin sensation. Wipe up any spilled liquids immediately or wash them with water if they come in contact with the skin or