pma-propidium

PMA (propidiummonoazide)

PRODUCTOMSCHRIJVING

PMA (propidiummonoazide) is een fotoreactieve DNA-bindende kleurstof die wordt gebruikt bij levensvatbaarheid-PCR (v-PCR) van micro-organismen zoals bacteriën, virussen en schimmels. PMA is verkrijgbaar als een gevriesdroogde vaste stof van 1 mg of een oplossing van 20 mM in water. Probeer ook PMAxx (40069), een superieur alternatief voor PMA.

PMA
PMA
  • Selectief levensvatbare cellen detecteren met behulp van qPCR
  • Gevalideerd in honderden publicaties
  • Dode cel specifieke kleurstof, bindt aan DNA
  • Hecht zich covalent aan DNA na fotoactivatie
  • Verkrijgbaar als 1 mg gevriesdroogde vaste stof of 20 mM oplossing in water
  • λ Abs  = 464 nm (vóór fotolyse); λ Abs /λ Em = ~510/~610 nm (met DNA/RNA, na fotolyse)

Voor meer informatie over de voordelen van het bepalen van de levensvatbaarheid van microben of cellen met behulp van levensvatbaarheid-PCR, gaat u naar de pagina over levensvatbaarheid PCR-technologie.

Product Catalogus nummer Eenheidsgrootte Formaat
PMA-kleurstof 40013 1 mg Gevriesdroogde vaste stof
PMA-kleurstof, 20 mM in H2O 40019 100 µL (20 mM in water) Oplossing

Over PMA

PMA-kleurstof is een DNA-modificator die is uitgevonden door wetenschappers van Biotium. Het is een fotoreactieve kleurstof die zich met hoge affiniteit aan DNA bindt. Na fotolyse met zichtbaar licht wordt PMA-kleurstof covalent gehecht aan DNA. Dit gemodificeerde DNA kan niet worden geamplificeerd door PCR. De kleurstof is ontworpen om celmembraan-ondoordringbaar te zijn. In een populatie van levende en dode cellen zijn dus alleen dode cellen vatbaar voor DNA-modificatie als gevolg van aangetaste celmembranen. Deze unieke eigenschap van PMA-kleurstof maakt het zeer nuttig bij selectieve detectie van levende bacteriën door qPCR.

Sinds Biotium voor het eerst PMA-kleurstof ontwikkelde, zijn er honderden publicaties geweest over het gebruik van de kleurstof in vele soorten monsters, waaronder tientallen bacteriestammen, biofilms, gist, schimmels, virussen en eukaryote cellen. Het is gebruikt in toepassingen zoals voedsel- en waterveiligheid en milieutests, en is gebruikt in combinatie met qPCR, NextGen Sequencing (NGS), Sanger-sequencing en Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP).

PMAxx-technologie wordt gedekt door verleende en/of hangende Amerikaanse en internationale octrooien.
pma cell dna
pma cell dna

Abstract

Propidiummonoazide (PMA) is een zeer selectieve kleurstof die alleen door de membraan aangetaste, dode microbiële cellen dringt en zowel DNA-extractie als amplificatie remt. PMA is op grote schaal gebruikt voor het onderscheid tussen levende en dode microbiële cellen; de toepassing van PMA in fytoplanktonstudies is echter beperkt. In deze studie hebben we geprobeerd de toepasbaarheid ervan voor de discriminatie van levensvatbaar fytoplankton te evalueren. We hebben PMA getest op zeven fytoplanktonsoorten,  Microcystis aeruginosa ,  Anabaena  sp.,  Aphanizomenon  sp.,  Synechocystis  sp.,  Cryptomonas ovata ,  Scenedesmus obliquus en  Nitzschia apiculata als vertegenwoordigers van respectievelijk de belangrijkste fytoplanktontaxa Cyanobacteria (eerste vier soorten), Chlorophyta, Cryptophyta en Bacillariophyta. Onze resultaten toonden aan dat toepassing van PMA op fytoplankton dat in zoet water leeft, het potentieel heeft om levensvatbare van dode cellen te onderscheiden, zoals in microbiële studies. In het bijzonder differentieerde PMA levensvatbare van dode cellen in cyanobacteriële soorten in plaats van in andere fytoplanktontaxa onder onze experimentele omstandigheden. Onze resultaten toonden echter ook aan dat het nodig kan zijn om verschillende omstandigheden aan te passen die de efficiëntie van de PMA-behandeling beïnvloeden om de toepasbaarheid op ander fytoplankton uit te breiden. Hoewel niet alle factoren die bijdragen aan de effecten van PMA konden worden geëvalueerd, toonde ons onderzoek de toepasbaarheid van op PMA gebaseerde moleculaire benaderingen, wat handige kwantitatieve methoden kunnen zijn om levend van dood fytoplankton in zoetwaterecosystemen te onderscheiden. Het instellen van optimale behandelingsomstandigheden voor andere fytoplanktonsoorten kan de werkzaamheid van op PMA gebaseerde moleculaire benaderingen verhogen.

 

[Linking template=”default” type=”products” search=”PMA” header=”3″ limit=”25″ start=”1″ showCatalogNumber=”true” showSize=”true” showSupplier=”true” showPrice=”true” showDescription=”true” showAdditionalInformation=”true” showImage=”true” showSchemaMarkup=”true” imageWidth=”” imageHeight=””]