Determination of human anti-SARS-CoV-2

ASSAYPROCEDURES

Stel alle reagentia vóór gebruik ten minste 30 minuten op kamertemperatuur (20-25 ° C).

 

 

 

Stap 1

Controles en specimen toevoegen:

Voeg 100 μl specimen, 100 μl blanco controle en 100 μl positieve controle toe aan hun respectievelijke putjes. Dubbele test wordt aanbevolen.

Opmerking: gebruik voor elke test een afzonderlijke pipetpunt om afvalbesmetting te voorkomen. Meng door zachtjes op de plaat te tikken.

 

Stap 2

Incubatie:

Bedek de plaat en incubeer gedurende 1 uur bij kamertemperatuur.

 

Stap 3

Wassen:

Gooi de inhoud weg en tik op de plaat op een schone papieren handdoek om de resterende oplossing in elk putje te verwijderen. Voeg 300 µl 1 × wasbuffer toe aan elk putje en incubeer gedurende 1

minuut. Gooi de 1 × wasbuffer weg en tik op de plaat op een

gentaur.be
gentaur.be
schone papieren handdoek om achtergebleven wasbuffer te verwijderen. Herhaal de

wasstap voor in totaal 3 wasbeurten.

Stap 4 HRP-geconjugeerde detectieoplossing toevoegen:

Voeg aan elk putje 100 µl 1 × detectieoplossing toe.

 

Stap 5

Incubatie:

Bedek de plaat en incubeer gedurende 1 uur bij kamertemperatuur.

Stap 6 Wass en:

Was elk putje 4 keer zoals beschreven in stap 3.

 

Stap 7

 

bij kame

Kleur:

Voeg 100 µl substraatoplossing toe aan elk putje en incubeer gedurende 15 minuten

 

rtemperatuur. Bescherm tegen licht. Stap 8

Reactie stoppen:

Voeg 100 µl stopoplossing toe aan elk putje en tik voorzichtig op de

plaatframe een paar seconden om een grondige menging te garanderen.

Meting:

Meet onmiddellijk de absorptie van elk putje bij 450 nm. Let op: lees de absorptie binnen 10 minuten na het stoppen van de reactie.

 

Stap 9

 

KWALITEITSCONTROLE

Elke microtiterplaat moet afzonderlijk worden overwogen bij het berekenen en interpreteren van de resultaten van de assay, ongeacht het aantal gelijktijdig verwerkte platen.

 

De testresultaten zijn geldig als aan de criteria voor kwaliteitscontrole is voldaan. Het wordt aanbevolen dat elk laboratorium de juiste kwaliteit vaststelt.

controlesysteem met materiaal voor kwaliteitscontrole dat vergelijkbaar is met of identiek is aan het patiëntmonster dat wordt geanalyseerd.

  • De absorptiewaarde van de blanco-controle moet <0,170 bij 450 nm
  • De absorptiewaarde van de positieve controle moet> 0,500 bij 450 nm

TYPISCHE RESULTATEN

 

gentaur.be
gentaur.be
Monsters OD450
 

Blanco controle

0.063
0,052
 

Positieve controle

0.661
0.658
 

Serum van gezonde proefpersonen

0.144
0.158
0.174
Serum van COVID-19

patiënten

0,511
0,656
0.361

 

  • Klinische validatiestudie van ImmunoDiagnostics SARS-CoV-2 S1RBD IgG ELISA werd uitgevoerd in 2020 in Shenzhen, China. Monsters werden verzameld uit door COVID-19 bevestigde gevallen met klinische symptomen, laboratoriumafwijkingen of manifestaties van pulmonale beeldvorming. Er zijn geen tests uitgevoerd op monsters van latente infecties of patiënten tijdens de

–  Het wordt sterk aanbevolen dat elk laboratorium zijn eigen normale en pathologische referentiebereik voor het anti-S1RBD IgG-niveau vaststelt. Bovendien wordt ook aanbevolen dat elk laboratorium zijn eigen panel controlemonsters in de assay opneemt.

PRESTATIEKENMERKEN

 

Inter Assay Precision
Samples CV
1 7,66%
2 6,68%
3 5,13%
Precisiemonsters Intra
Assay CV
1 5,78%
2 6,31%
3 4,55%

 

VOORZORGSMAATREGELEN EN VEILIGHEID

De ELISA-tests zijn tijd- en temperatuurgevoelig. Volg de stappen van de testprocedure strikt om onjuiste resultaten te voorkomen.

  1. Wissel geen reagentia uit verschillende partijen uit en gebruik geen reagentia uit andere in de handel verkrijgbare kits. De componenten van de kit zijn nauwkeurig op elkaar afgestemd voor een optimale uitvoering van de tests.
  1. Zorg ervoor dat alle reagentia binnen de geldigheidsduur vallen die op de kitdoos en van dezelfde partij is aangegeven. Gebruik nooit reagentia na de vervaldatum vermeld op etiketten of
gentaur.be
gentaur.be

 

  1. VOORZICHTIG – KRITISCHE STAP: Laat de reagentia en monsters vóór gebruik op kamertemperatuur (20-25 ° C) komen. Reagens voorzichtig schudden voor gebruik. Direct na gebruik terugbrengen bij 2-8 °
  2. Gebruik alleen voldoende volume van het monster zoals aangegeven in de Als u dit niet doet, kan dit een lage gevoeligheid van de test veroorzaken.
  3. Raak de buitenbodem van de putten niet aan; vingerafdrukken of krassen kunnen het lezen verstoren. Zorg er bij het lezen van de resultaten voor dat de bodem van de plaat droog is en dat er geen luchtbellen in de putjes
  4.  Laat de microtiterplaatwells na de wasstap nooit drogen. Ga onmiddellijk door naar de volgende stap. Vermijd de   vorming van luchtbellen bij het toevoegen van de reagentia.
  1. Vermijd langdurige onderbrekingen van Zorg voor dezelfde arbeidsomstandigheden voor alle putten.
  2. Kalibreer de pipet regelmatig om de nauwkeurigheid van de verstrekking van monsters / reagentia te verzekeren. Gebruik voor elk monster en reagentia verschillende pipetpunten voor verwijdering om kruisbesmetting te
  3. Raak bij het toevoegen van monsters de bodem van de put niet aan met de

10. Bepaal bij het meten met een plaatlezer de absorptie bij 450 nm of bij 450/600~ 650 nm.

11.  De enzymatische activiteit van het HRP-conjugaat kan worden beïnvloed door stof en reactieve chemicaliën en stoffen zoals natriumhypochloriet, zuren, logen, enz. Voer de test niet uit in aanwezigheid van deze stoffen.

  1. Alle monsters van menselijke oorsprong moeten als potentieel infectieus worden beschouwd. Strikte naleving van GLP-regels (Good Laboratory Practice) kan de persoonlijke veiligheid garanderen.
  2. Eet, drink, rook of breng nooit cosmetica aan in het testlaboratorium. Pipetteer nooit oplossingen via de mond.
  3. Chemische stoffen mogen alleen worden gehanteerd en verwijderd in overeenstemming met de huidige GLP (Good Laboratory Practices) en de lokale of nationale
  1. De pipetpunten, injectieflacons, strips en monsterhouders moeten worden verzameld en geautoclaveerd gedurende ten minste 2 uur bij 121 ° C of gedurende 30 minuten worden behandeld met 10% natriumhypochloriet om vóór verdere verwijdering te worden ontsmet. Oplossingen die natriumhypochloriet bevatten, mogen NOOIT worden Material Safety Data Sheet (MSDS) beschikbaar op aanvraag.

gentaur.be

 

16. Sommige reagentia kunnen als grondstof toxiciteit, irritatie, brandwonden of carcinogene effecten veroorzaken. Contact met de huid en het slijmvlies moet worden vermeden, maar is niet beperkt tot de volgende reagentia: de stopoplossing, de substraatoplossing en de wasbuffer.

  1. De stopoplossing 2M H 2 ZO 4 is een Gebruik het met gepaste zorg. Veeg gemorste vloeistoffen onmiddellijk op en was ze met water als ze in contact komen met de huid of ogen.
  1. ProClinTM 300 0,1% als conserveermiddel gebruikt, kan huidgevoel veroorzaken. Veeg gemorste vloeistoffen onmiddellijk op of was ze met water als ze in contact komen met de huid of