antibody stripping buffer

antilichaam strippen buffer

Naam: Antibody Stripping Solution
Catalogusnummer: L7710A, 500ml* GV0480, 500ml 5X
*Voldoende reagentia voor 3000 cm2 of 200-400 membraanstrips of 20-40 standaardblots
• Bewaring: Bewaren bij kamertemperatuur (voor lange bewaring: +4C°) (L)
● Geen penetrante ruikende mercapto-ethanol Bespaar tijd
● Het strippen van antilichamen gebeurt bij kamertemperatuur. Geen verwarming van blots vereist Bespaart kostbaar monster
● Strip antilichamen in slechts ongeveer 15 minuten bij kamertemperatuur Economisch
● Herblokkering van blots kan in de meeste gevallen worden vermeden

Western Blot-stripbuffer

De Western BLoT-stripbuffer is een oplossing voor het verwijderen van primaire en secundaire antilichamen uit onderzochte Western-blot-membranen. Antilichaamverwijdering met deze buffer kan plaatsvinden onder milde omstandigheden (kamertemperatuur, 30 min incubatie), waardoor verlies van geïmmobiliseerd eiwit uit het membraan wordt geminimaliseerd. Bij gebruik van een PVDF-membraan kan hetzelfde membraan 2-5 keer worden gestript en opnieuw worden gesondeerd. Na het strippen kunnen membranen opnieuw worden onderzocht, ofwel met een andere concentratie van primair antilichaam of met een geheel ander primair antilichaam.

Kat. # Product Maat Licentie Hoeveelheid Details
T7135A Western BLoT-stripbuffer 500 ml *
De Western BLoT-stripbuffer is een reagens dat primaire en secundaire antilichamen van Western-blot-membranen kan verwijderen. Na behandeling met de Stripping Buffer kan het membraan hergebruikt worden; het is mogelijk om het membraan te onderzoeken met ofwel een andere concentratie van primair antilichaam of met een geheel ander primair antilichaam. Met dit product verloopt de antilichaamverwijderingsreactie onder relatief milde omstandigheden (kamertemperatuur, 30 minuten), en daarom is er zeer weinig verlies van geïmmobiliseerd eiwit uit het membraan. Bij gebruik van een PVDF-membraan kan hetzelfde membraan 2-5 keer worden gestript en opnieuw worden gesondeerd.

 

Blokkeerbuffer Blokkerend middel Hoogtepunten Wanneer te gebruiken Beschikbare formaten
Startblok

Serum- en biotinevrij enkelvoudig gezuiverd eiwit

  • Presteert goed met een breed scala aan antilichamen en antilichaamcombinaties.
  • Compatibel met streptavidine-systemen
  • Blokkeert in minder dan 15 minuten
  • Het beste voor middelhoge overvloedige eiwitten of sterke antilichaamaffiniteit
  • Hoge achtergrond met huidige blokkeerbuffer
  • Western blots strippen en verwerpen
PBS
TBS
PBST
TBST
Blokker FL

Enkel gezuiverd eiwit

  • Blokkeert overtollige niet-specifieke bindingsplaatsen om achtergrondfluorescentie te verminderen,
  • Werkt met zowel nitrocellulose als PVDF met lage fluorescentie
  • Wasmiddelvrij
  • Blokkeert in 15-30 minuten
  • Fluorescentie western blotting
  • Beeldvorming en opslag van droge fluorescentieblots
10X
Doorboren Clear Milk Blocking Buffer

Geklaarde en gestabiliseerde melkeiwitten

  • Hoogwaardige vervanging voor zelfgemaakte melkblokkerende buffers in Western blotting-toepassingen
  • Lange houdbaarheid bij kamertemperatuur
  • Gebruiken wanneer een hoge achtergrond wordt gezien met magere melk
  • Fluorescerende en chemiluminescente toepassingen
Boraat, pH 7,6
SuperBlock

Serum- en biotinevrij enkelvoudig gezuiverd glycoproteïne

  • Op eiwit gebaseerde formulering bevat geen immunoglobulinen, albumine of endogeen biotine, waardoor het compatibel is in veel situaties waar traditionele blokkers falen.
  • Biotinevrij voor gebruik met streptavidinesysteem
  • Blokkeert in minder dan 10 minuten
  • Hoge achtergrond met huidige blokkeerbuffer
PBS
TBS
PBST
TBST
SEA BLOCK-blokkeringsbuffer

Steelhead zalmserum

  • Nuttig bij detectiemethoden waarbij zoogdiermonsters betrokken zijn.
  • Bijzonder effectief bij toepassingen met fluorescentiebeeldvorming
  • Zoogdiermonsters
  • Fluorescentie western blotting
PBS
Blokker BSA

Gezuiverd runderserumalbumine

  • 10% oplossingen van hoogwaardig runderserumalbumine
  • Enkelvoudig gezuiverd eiwit biedt minder kans op kruisreacties met testcomponenten dan serum- of melkoplossingen
  • Gebruik bij het richten op fosfo-eiwitten
  • Best te gebruiken bij het opslaan van hergebruikte antilichamen in blocker
PBS
TBS
Blocker Caseïne

Gezuiverde caseïne

  • Een enkele eiwitblokkerende buffer biedt minder kans op kruisreacties met testcomponenten dan serum- of melkoplossingen
  • Gebruiken wanneer een hoge achtergrond wordt gezien met niet-vette melkblokkers
PBS
TBS
Blokker BLOTTO

Droge melk zonder vet

  • Kant-en-klare 5%-oplossing van magere melkpoeder
  • Gemak – klaar voor gebruik
  • Meer consistent product dan zelfgemaakte blokkers
TBS
Eiwitvrij

Niet-eiwitblokkerende verbinding

  • Minimaliseert of elimineert kruisreactiviteit geassocieerd met op eiwit gebaseerde blokkerende buffers.
  • Monster-en-antilichaamcombinaties vereisen de eliminatie van alle mogelijke exogene dierlijke eiwitten in het testsysteem om kruisreacties of uitdoving van de gewenste probefunctie te voorkomen
  • Gebruik wanneer blokkers op basis van eiwitten een hoge achtergrond veroorzaken
PBS
TBS
PBST
TBST
Doorboren snel blokkerende buffer

Enkel gezuiverd eiwit

  • Blokkeert in 5 minuten
  • Wanneer tijd essentieel is
TBS
SuperSignal Western Blot Enhancer

Membraanbehandeling voor antilichamen met een lage abundantie of een slechte immunoreactiviteit

  • Voorbehandeling voor nitrocellulosemembranen
  • Vermindert de hoeveelheid primair antilichaam die nodig is voor sonderen
  • Gebruik wanneer primair antilichaam 3 tot 100 keer minder primair antilichaam is dan gewoonlijk wordt gebruikt om het gewenste eiwit te detecteren
Klaar voor gebruik

 

antibody stripping buffer
antibody stripping buffer

Het strippen en opnieuw onderzoeken van Western-blots biedt verschillende voordelen:

  1. Bewaring van monsters die duur zijn of slechts in beperkte hoeveelheden beschikbaar zijn;
  2. Analyse van een bepaalde blot met behulp van verschillende antilichamen, bijv. subtype- of isovorm-specifieke antilichamen;
  3. Heranalyse van afwijkende resultaten en bevestiging met hetzelfde of een ander antilichaam;
  4. Correctie van fouten in incubatie met het verkeerde antilichaam;
  5. Kostenbesparing in reagentia en tijd door dezelfde blot opnieuw te gebruiken.

Er zijn verschillende protocollen gepubliceerd voor het strippen van antilichamen uit Western-blots, waaronder die welke gebruik maken van lage pH, warmte en detergent, en chaotrope middelen. Hieronder worden drie aanbevolen protocollen weergegeven. De eerste is toepasbaar op elk chemiluminescent substraatsysteem en gebruikt een combinatie van detergent en warmte om de antilichamen vrij te maken. De tweede wordt vaak gebruikt voor toepassingen waarbij antilichamen van een antigeen moeten worden gescheiden en gebruikt een lage pH om de structuur van het antilichaam zodanig te veranderen dat de bindingsplaats niet langer actief is.

Het derde protocol maakt gebruik van de ReBlot™ Plus Western Blot Recycling Kit die speciaal is ontwikkeld voor het strippen van antilichamen van Western Blot-membranen. Voordelen van deze aanpak zijn onder meer:

  • Vermijden van geur gerelateerd aan β-mercaptoethanol.
  • Verwerking op kamertemperatuur.
  • Verwijdering van antilichamen in 15 minuten.

 

Geen van deze methoden verwijdert de gekleurde precipitaten die worden gegenereerd door chromogene detectiesystemen (bijv. BCIP, 4CN, DAB en TMB). Het is echter nog steeds mogelijk om de blot te analyseren met een ander antilichaam dat specifiek is voor een ander doeleiwit.

Gewoonlijk dienen deze protocollen alleen voor kwalitatieve doeleinden te worden gebruikt, tenzij is vastgesteld dat strippen geen kwantitatief effect heeft op een bepaald antigeen. Afhankelijk van de methode en het type membraan dat wordt gebruikt, zijn veel antigenen bestand tegen ten minste 5 stripcycli. Er moet echter rekening mee worden gehouden dat tijdens elke stripcyclus kleine porties membraan-geïmmobiliseerde eiwitten zullen worden verwijderd. Wanneer meerdere antigenen achter elkaar moeten worden gedetecteerd, wordt aanbevolen om te beginnen met antigenen waarvan wordt verwacht dat ze in een lagere abundantie voorkomen of minder signaal opleveren.

Hier zijn enkele aanvullende aanbevelingen bij het plannen van een Western-blot-experiment met een of meer ronden van antilichaamstripping.

  • PVDF-membranen zijn robuuster dan nitrocellulose en worden daarom aanbevolen voor elk protocol waarbij antistoffen worden gestript.
  • Het drogen van PVDF-membranen onmiddellijk na overdracht van de SDS-PAGE-gel verbetert de binding van eiwitten aan het membraan en wordt met name aanbevolen wanneer meerdere strippingen gepland zijn. Droge PVDF-membranen moeten vóór de eerste immunodetectieronde opnieuw worden bevochtigd met alcohol.
  • Detecteer eerst lage-overvloedige antigenen.
  • Gebruik antilichamen met lage affiniteit vóór antilichamen met hoge affiniteit.
  • Belangrijk:  Hoewel het drogen van een PVDF-blot onmiddellijk na de overdracht wordt aanbevolen, mag de blot niet tussen de immunodetectieronden drogen. Alle resterende antilichaammoleculen zullen permanent aan het membraan binden als het wordt gedroogd.

 

 

WB / Antibody Stripping Buffer

20-abx090656
  • EUR 189.00
  • EUR 230.00
  • 100 ml
  • 200 ml
  • Shipped within 5-10 working days.

WB / Antibody Stripping Buffer

abx090671-200ml 200 ml
EUR 189
  • Shipped within 5-10 working days.

West Ez Stripping Buffer

S2100-006 60ml
EUR 81

West Ez Stripping Buffer, Economic Size

S2100-050 500ml
EUR 212

West Ez Stripping Buffer, Economic Size

S2100-100 2x500ml
EUR 280

Western blot recycling stripping buffer, 50 ml (10X)

90101 50 ml
EUR 238

Phospho Antibody Stripping Solution

AKR-102 1 kit
EUR 392
Description: This reagent allows you to strip phospho antibodies from protein blots and subsequently re-probe the same blot.

101Bio WB Stripping Solution

P5W3 NULL
EUR 0

T-Pro Western Blot Stripping Reagent

JB11-K002 500ml/BT
EUR 178

Antibody diluent buffer

AR1106-2 12ml
EUR 91

Binding Buffer

BB10X-50ML 50 ML
EUR 113.7

Tricine buffer

20-abx082551
  • EUR 217.00
  • EUR 189.00
  • 100 g
  • 25 g
  • Shipped within 5-10 working days.

Wash Buffer

abx098952-20ml 20 ml
EUR 91
  • Shipped within 5-7 working days.

Coating Buffer

abx098970-1vial 1 vial
EUR 154
  • Shipped within 5-7 working days.

Blocking Buffer

abx098972-1vial 1 vial
EUR 154
  • Shipped within 5-7 working days.

Lysis Buffer

abx098984-LysisBuffer120ml Lysis Buffer 1 (20 ml)
EUR 154
  • Shipped within 5-7 working days.

Lysis Buffer

abx098984-LysisBuffer3100ml Lysis Buffer 3 (100ml)
EUR 230
  • Shipped within 5-7 working days.

Lysis Buffer

abx098984-LysisBuffer420ml Lysis Buffer 4 (20 ml)
EUR 154
  • Shipped within 5-7 working days.

Binding Buffer

abx290019-50ml 50 ml
EUR 230
  • Shipped within 3-5 working days.

Wash Buffer

abx293002-30ml 30 ml
EUR 105
  • Shipped within 5-10 working days.
Scroll to Top